有效抑制引起食品發(fā)黏的菌類(枯草桿菌)、馬鈴薯?xiàng)U菌和細(xì)菌,延長(zhǎng)保質(zhì)期。
主要配料:
丙酸鈉、葡萄糖酸-δ-內(nèi)酯、脫氫乙酸鈉、D-異抗壞血酸鈉
使用范圍:
04.04.02 發(fā)酵豆制品
使用方法:
混勻
建議用量:
按總量計(jì),3g/kg
規(guī)格:
1kg×20包
參考舉例
豆豉、腐乳和豆醬作為我國(guó)傳統(tǒng)大豆發(fā)酵食品的典型
代表,其營(yíng)養(yǎng)保健功能日益引起世界各國(guó)食品界和醫(yī)學(xué)界
的高度重視。其產(chǎn)業(yè)發(fā)展非常迅速,如貴州的“老干媽”是
以豆豉為基料的油辣椒而出名;腐乳以“王致和”、 “巨樹”
等品牌名氣較大;而豆醬則有“海天”、 “6月黃”等形成了強(qiáng)
勢(shì)的知名品牌和消費(fèi)口碑。但是由于豆類發(fā)酵品生產(chǎn)工藝
的特殊性,其在發(fā)酵過(guò)程中易受原料品質(zhì)波動(dòng)、雜菌污染
以及環(huán)境因素的影響,存在較大的安全隱患,如生物胺、
丙烯酰胺、蠟樣芽孢桿菌、氨基甲酸乙酯等已被學(xué)者研究
報(bào)告。這側(cè)面說(shuō)明發(fā)酵大豆制品的原料、工藝、加工方式、
最終產(chǎn)品定型等均可能影響產(chǎn)品最終的質(zhì)量,存在可能的
安全隱患。
1 豆豉、腐乳、豆醬生產(chǎn)工藝流程及安全隱患
1.1 工藝流程
盡管發(fā)酵豆制品大多以大豆或黑豆為主要原料,但
原料不同、地域不同、加工季節(jié)不同,導(dǎo)致產(chǎn)品最終形態(tài)不
同,產(chǎn)品的色澤、香氣、滋味差異很大,故各類發(fā)酵大豆制
品之間質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)也有差異。
1.1.1 豆豉
中國(guó)豆豉種類很多,優(yōu)勢(shì)微生物不同種類也不同。根
據(jù)最終產(chǎn)品定型的差異:有水豆豉和油豆豉等;根據(jù)水分
含量不同:有濕豆豉和干豆豉;根據(jù)藥用價(jià)值不同:有淡豆
豉和咸豆豉。結(jié)合目前不同區(qū)域的生產(chǎn)情況,豆豉生產(chǎn)的
基本流程如下 [1-2] :
黃豆(黑豆)→浸泡(季節(jié)不同時(shí)間稍有差異)→清洗、瀝干→
蒸煮→冷卻→自然發(fā)酵或接種發(fā)酵(毛霉型、米曲霉型、根霉型、
細(xì)菌型等,時(shí)間長(zhǎng)短不一)→發(fā)酵成熟→加食鹽、香辛料等密封、
厭氧發(fā)酵(自然溫度或恒溫控制發(fā)酵)→發(fā)酵時(shí)間3~12月不等→
直接干制或直接包裝→成品←包裝←高溫炒制、調(diào)味 坻
1.1.2 腐乳
腐乳一般是采用大豆為主要原料,將大豆制成豆腐白
坯后,接種微生物(毛霉、根霉、細(xì)菌等)發(fā)酵,經(jīng)過(guò)鹽漬、酒
水發(fā)酵、調(diào)味等工序發(fā)酵而成。其可分為干性(豆腐表面除
調(diào)味用香辛料外,不額外添加油或其他調(diào)味汁)、油性(加
入大量的食用植物油進(jìn)行調(diào)味保質(zhì))、調(diào)味汁(加入調(diào)整
好的調(diào)味液或面醬、糟米等)3大類?;玖鞒?[3] 如下:
黃豆→浸泡(季節(jié)不同時(shí)間稍有差異)→清洗、瀝干→磨漿、
漿渣分離→煮漿→點(diǎn)漿(采用石膏、鹵水、酸漿水)→涼花→壓榨→
成型
→加鹽水煮制→按種小球菌→發(fā)酵(加入面醬等)→成品
→25~30 ℃自然發(fā)酵→直接加鹽、調(diào)味料等→成品
→接種或自然發(fā)酵(毛霉、根霉等)→搓毛→酒水發(fā)酵→
瀝干→酒水、后期調(diào)味→成品
1.1.3 豆醬
豆醬一般是采用黃豆、面粉為主要原料,經(jīng)過(guò)制曲發(fā)
酵、加鹽水發(fā)酵后調(diào)成為不同味道(咸醬和甜面醬等)的
濃稠狀產(chǎn)品。工藝流程 [4] 如下:
黃豆→浸泡(季節(jié)不同時(shí)間稍有差異)→清洗、瀝干→蒸熟→
冷卻(拌或不拌面粉、熟豆碾碎或成型)→自然發(fā)酵或接種發(fā)酵
(一般均以米曲霉為主)→制曲成熟→加鹽水發(fā)酵曬制或恒溫發(fā)
酵3~6個(gè)月)→發(fā)酵成熟→熬制或調(diào)味→灌裝→殺菌→成品
1.2 發(fā)酵豆制品釀制工藝特點(diǎn)及安全隱患
1.2.1 發(fā)酵豆制品產(chǎn)品主要特點(diǎn)
發(fā)酵豆制品均是以大豆為原料,同時(shí)經(jīng)過(guò)前期發(fā)酵或
制曲(讓微生物生長(zhǎng)并形成酶系)和后期加鹽水長(zhǎng)時(shí)間發(fā)
酵,形成產(chǎn)品特色,而其要形成特色市場(chǎng)化產(chǎn)品均需要經(jīng)
過(guò)后期調(diào)味或殺菌以符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)。產(chǎn)品的主要成分均包
括蛋白質(zhì)的分解產(chǎn)物氨基酸(產(chǎn)品以氨基酸態(tài)氮為關(guān)鍵指
標(biāo))、碳水化合物的代謝產(chǎn)物糖類(醬類產(chǎn)品有還原糖的
指標(biāo))、脂肪的分解產(chǎn)物脂肪酸。除腐乳外,其他兩類變成
市場(chǎng)化產(chǎn)品均有油炸、高溫熬制、殺菌的工藝過(guò)程。另外由
于產(chǎn)品性質(zhì),除出口腐乳關(guān)注蠟樣芽孢桿菌指標(biāo)外,其他
產(chǎn)品均無(wú)細(xì)菌總數(shù)指標(biāo),只有微生物安全指標(biāo) [5-6] 。
1.2.2 安全隱患
工藝過(guò)程存在安全隱患 [7] 如下:(1)前發(fā)酵或制曲過(guò)
程除少量采用純種發(fā)酵外,很多企業(yè)均采用自然發(fā)酵或粗
放的發(fā)酵方式。前期發(fā)酵微生物種類很多(如霉菌、酵母、
細(xì)菌等);前期發(fā)酵時(shí)間一般短的為48 h,長(zhǎng)的可以有10~
15 d; (2)后期發(fā)酵過(guò)程比較長(zhǎng),3~12個(gè)月不等,除條件較
好的企業(yè)采用控溫發(fā)酵外,其他企業(yè)一般采用開(kāi)放式發(fā)酵
等; (3)后熟完成后,豆豉一般需要進(jìn)行高溫炒制調(diào)味;醬
類產(chǎn)品需要熬制調(diào)味和后期調(diào)味再進(jìn)行巴氏殺菌;腐乳生
產(chǎn)基本上沒(méi)有殺菌的過(guò)程,完全依賴高鹽、高酒精含量進(jìn)
行保質(zhì); (4)由于加工的豆豉產(chǎn)品油性成分較高,一般采用
玻璃瓶或塑料瓶等包裝;由于封口均有密封圈存在,所以
存在包裝材料污染的問(wèn)題(如礦物油、塑化劑鄰苯二甲酸
乙酯等)。當(dāng)然,生產(chǎn)過(guò)程中原料含有黃曲霉毒素的問(wèn)題、
食品添加劑不規(guī)范及超范圍超量使用問(wèn)題等一般的食品
安全問(wèn)題不在本文的討論之列。
2 發(fā)酵豆制品中安全隱患因子研究的現(xiàn)狀
2.1 蠟樣芽孢桿菌
蠟樣芽孢桿菌在發(fā)酵豆制品中的安全隱患已有學(xué)者
研究報(bào)告,其中以腐乳研究較多。我國(guó)腐乳生產(chǎn)產(chǎn)業(yè)無(wú)論
從腐乳生產(chǎn)專用微生物選育、工藝控制、發(fā)酵調(diào)控、產(chǎn)業(yè)規(guī)
模均取得了長(zhǎng)足的進(jìn)步,但由于我國(guó)傳統(tǒng)發(fā)酵食品多為開(kāi)
放式生產(chǎn),且腐乳生產(chǎn)周期長(zhǎng),一般沒(méi)有后殺菌的過(guò)程,
腐乳中微生物數(shù)量較高特別是蠟樣芽孢桿菌數(shù)量多,已
經(jīng)直接影響到腐乳的出口。蠟樣芽孢桿菌數(shù)量一般控制在
10 5 CFU/g,以不會(huì)引起食物中毒為判斷標(biāo)準(zhǔn) [8] 。伊鋆等 [9] 研
究發(fā)現(xiàn),腐乳中蠟樣芽孢桿菌的檢出率較高,不同腐乳中
蠟樣芽孢桿菌的含量不同(10~10 5 CFU/g)。HANBZ等 [10] 檢
測(cè)到腐乳中蠟樣芽孢桿菌( Bacillus cereus )、產(chǎn)氣莢膜梭菌
( Clostridium perfringens )、金黃色葡萄球菌( Staphylococcus
aureus )、單核細(xì)胞增生李斯特菌( Listeria monocytogenes )
等致病菌的存在。謝婧等 [11] 對(duì)27個(gè)樣品中耐熱的微生物進(jìn)
行分析發(fā)現(xiàn),耐熱性微生物*占98%,*也有0.8%。韓
北忠等 [12] 對(duì)腐乳中蠟樣芽胞桿菌進(jìn)行分離鑒定,發(fā)現(xiàn)部分
腐乳中蠟樣芽胞桿菌數(shù)量達(dá)到10 5 CFU/g,存在一定安全隱
患。楊秋枚等 [13] 對(duì)從11份農(nóng)家和7份市場(chǎng)上銷售的自然發(fā)
酵黃豆醬樣品進(jìn)行了微生物的安全性檢驗(yàn),結(jié)果表明蠟樣
芽孢桿菌的檢出率為30%,但含量不高。蔣榮榮等 [14] 研究
豆豉中蠟樣芽胞桿菌的存在情況發(fā)現(xiàn),豆豉樣品中蠟樣芽
孢桿菌檢出的幾何均數(shù)為21.2~466.0 CFU/g??邓胤业?[15]
對(duì)豆制品中建立蠟樣芽孢桿菌的快速檢測(cè)方法進(jìn)行研
究,利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)
檢測(cè)蠟樣芽孢桿菌靈敏度為10 2 CFU/mL,檢測(cè)時(shí)間為4 h。
但從目前檢測(cè)結(jié)果來(lái)說(shuō)一般還是在控制的范圍之類。
2.2 生物胺
發(fā)酵食品中過(guò)量的生物胺會(huì)對(duì)機(jī)體健康造成不良的影
響。LUYM等 [16] 檢測(cè)發(fā)現(xiàn),中國(guó)豆醬中主要含有酪胺、組胺
和亞精胺,不同發(fā)酵類型品種生物胺有差別,生物胺生成
量與樣品中氨基酸態(tài)氮含量呈現(xiàn)正相關(guān)。于湘莉等 [17] 在發(fā)
酵納豆樣品中檢測(cè)到亞精胺、精胺、腐胺、酪胺4種生物
胺,其中亞精胺的含量占總生物胺的70%左右,與人體有
直接毒性的生物胺—酪胺含量<14 mg/kg,95%以上的生
物胺都是對(duì)人體沒(méi)有直接毒性的多聚胺。TANG T等 [18] 檢
測(cè)了腐乳中生物胺的含量,同時(shí)比較了微生物發(fā)酵腐乳與
酶制腐乳中生物胺含量的差別。腐乳中主要含有色胺、腐胺、
組胺和酪胺,其平均含量分別為39.0 mg/kg、34.6 mg/kg、
18.2 mg/kg、21.7mg/kg, β -苯乙胺、亞精胺和精胺含量較低。
微生物發(fā)酵腐乳中生物胺總量(129.0 mg/kg)低于酶制腐
乳(137.7 mg/kg),腐乳中生物胺總量低于安全限量。蘇悟
等 [19] 研究1種細(xì)菌型豆豉自然發(fā)酵過(guò)程中的生物胺生成情
況時(shí)發(fā)現(xiàn),酪胺含量較高,組胺一直呈現(xiàn)上升趨勢(shì),但在
相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)范圍之內(nèi);MOON J S等 [20] 研究發(fā)現(xiàn), Pseudomonas
sp.和 Clostridium sp.是豆醬生產(chǎn)中產(chǎn)生酪胺和組胺的主要
微生物。王充等 [21] 采用高效液相色譜分析醬油、豆醬、豆豉
中的生物胺時(shí)發(fā)現(xiàn),大豆發(fā)酵制品中色胺沒(méi)有檢出,但組
胺較高。王穎等 [22] 研究比較不同微生物腐乳前發(fā)酵后生物
胺的生成情況差異,雅致放射性毛霉的腐乳中尸胺、酪胺
產(chǎn)量較高且其他的生物胺均<100mg/kg,少孢根霉發(fā)酵時(shí)
尸胺*,其余7種生物胺含量均<50 mg/kg。胡鵬等 [23] 研
究了中國(guó)幾種發(fā)酵豆豉的生物胺含量,發(fā)現(xiàn)豆豉品種不同,
生物胺的數(shù)量為101.07~421.19mg/kg變化。王光強(qiáng)等 [24] 提
及美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局(food anddrug administration,
FDA)要求進(jìn)口水產(chǎn)品組胺不得超過(guò)50mg/kg,歐盟規(guī)定鯖
科魚類中組胺含量不得超過(guò)100mg/kg;其他食品中組胺不
得超過(guò)100 mg/kg,酪胺不得超過(guò)100~800 mg/kg,我國(guó)規(guī)
定鮐魚中組胺不得超過(guò)1 000 mg/kg,其他海水魚不得超過(guò)
300 mg/kg。由于目前生物胺的指標(biāo)只在魚類制品中涉及,
豆制品中生物胺尚處在研究階段,參照不同類別國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)
要求沒(méi)有安全風(fēng)險(xiǎn),但還沒(méi)有針對(duì)豆制品做出廣泛的調(diào)查
和評(píng)估,所以值得關(guān)注。
2.3 丙烯酰胺
在發(fā)酵豆制品中,由于豆豉和豆醬等發(fā)酵完成后,在
形成具有一定保質(zhì)期的商品化產(chǎn)品之前均有煎炒和高溫
熬制的過(guò)程,有可能會(huì)生成丙烯酰胺,因此丙烯酰胺的含
量存在一定隱患。朱雨辰等 [25] 綜述了提到丙烯酰胺在這個(gè)
工藝條件下可以形成而在豆制品產(chǎn)品中是否存在備受關(guān)
注。在煎、烤、炸等高溫烹飪(高于120 ℃)條件下,天冬酰胺
酸與還原糖發(fā)生美拉德反應(yīng),是產(chǎn)生大量丙烯酰胺的主要
途徑,同時(shí)油脂、蛋白質(zhì)和碳水化合物等成分在高溫的條
件下會(huì)生成丙烯醛進(jìn)而形成丙烯酰胺 [26] 。TARAKE E等 [27]
研究發(fā)現(xiàn),37 ℃、pH 7.4條件下,天冬酰胺在被氧化的過(guò)程
中也能產(chǎn)生丙烯酰胺;YASUHARA A等 [28] 發(fā)現(xiàn)氨和丙烯醛
可在各種溫度甚至在室溫條件下反應(yīng)生成丙烯酰胺。張帥
等 [29-30] 分別采用高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(high performance
liquid chromatography-tandem mass spectrometry,HPLC-MS)
法或氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(gas chromatography- mass spec-
trometer,GC-MS)法測(cè)定,豆豉、豆瓣醬、腐乳、醬油等發(fā)酵
豆制品的丙烯酰胺含量分別達(dá)1 000~15 000 μg/kg、400~
2 000 μg/kg、2 000~8 000 μg/kg和5~1 152 μg/kg。朱雨辰
等 [25] 在食品中丙烯酰胺形成進(jìn)展研究中提及高溫蒸煮(溫
度超過(guò)100 ℃)可以形成丙烯酰胺,但100 ℃以內(nèi)可以減少
形成的機(jī)率。文安燕等 [31] 研究了貴州主要發(fā)酵豆制品加工
中丙烯酰胺形成動(dòng)態(tài),隨著發(fā)酵過(guò)程的進(jìn)行,丙烯酰胺的
含量呈上升趨勢(shì)。到發(fā)酵結(jié)束時(shí),黑豆豉、水豆豉、豆瓣醬
制品產(chǎn)業(yè)由于存在缺乏重視投入,基礎(chǔ)研究薄弱、生產(chǎn)技
術(shù)落后、工業(yè)化程度低、產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定及安全有隱患等
問(wèn)題而嚴(yán)重影響了其發(fā)展。
3.1 強(qiáng)化對(duì)生產(chǎn)過(guò)程中的安全隱患生產(chǎn)途徑的基礎(chǔ)研究,
為產(chǎn)業(yè)化控制奠定理論基礎(chǔ)
(1)建立發(fā)酵大豆制品安全隱患因子的大數(shù)據(jù)庫(kù):我
國(guó)發(fā)酵大豆制品具有濃厚的消費(fèi)氛圍,但地域不同、工藝
差別很大,產(chǎn)品類別很多,消費(fèi)習(xí)慣差異大。應(yīng)該對(duì)不同區(qū)
域大豆發(fā)酵制品進(jìn)行全面的采樣分析,針對(duì)目前已經(jīng)掌握
的安全隱患因子進(jìn)行充分調(diào)研和分析,建立大數(shù)據(jù)庫(kù)。
(2)建立各類不同大豆發(fā)酵制品工業(yè)化生產(chǎn)規(guī)范的流
程和工藝控制數(shù)據(jù)庫(kù):不同生產(chǎn)工藝、不同產(chǎn)品特色、具有
不同的消費(fèi)和飲食習(xí)慣,需要有針對(duì)性的對(duì)不同類型大豆
發(fā)酵制品生產(chǎn)過(guò)程中產(chǎn)生風(fēng)險(xiǎn)因子的情況進(jìn)行摸底,進(jìn)
行動(dòng)態(tài)分析,加強(qiáng)對(duì)發(fā)酵大豆食品中安全隱患因子的檢驗(yàn)
方法研究,開(kāi)展代表性大豆食品中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和危害物質(zhì)檢
測(cè),掌握產(chǎn)生隱患因子的關(guān)鍵控制點(diǎn)(critical control point,
CCP),為工藝調(diào)整和技術(shù)升級(jí)提供依據(jù)。
(3)強(qiáng)化危害物產(chǎn)生機(jī)理和安全控制基礎(chǔ)研究,建立
安全隱患因子的自動(dòng)化、智能化、連續(xù)化控制技術(shù):由于
發(fā)酵過(guò)程復(fù)雜性,原料組分、組分與加工工藝、組分與添
加劑、組分與功能成分之間會(huì)隨著加工工序和步驟的變化
發(fā)生動(dòng)態(tài)變化,導(dǎo)致危害物的產(chǎn)生和演變,因此需要從分
子水平深入研究危害物形成與影響食品安全和健康的分
子基礎(chǔ),以為解決對(duì)導(dǎo)致危害物生成的加工模式和原料組
成進(jìn)行定向調(diào)控提供依據(jù)。同時(shí)建立產(chǎn)品生產(chǎn)過(guò)程監(jiān)控體
系和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。同時(shí)借用現(xiàn)有的研究成果對(duì)控制技術(shù)進(jìn)行
實(shí)踐,提高科技成果轉(zhuǎn)化效率,提升企業(yè)控制水平:對(duì)于
蠟樣芽胞桿菌 [41-42] 、丙烯酰胺 [26] 、生物胺 [43-44] 、氨基甲酸乙酯
的控制已經(jīng)取得了一定的研究成果,應(yīng)該將理論研究成果
和具體實(shí)際結(jié)合起來(lái),達(dá)到控制的目的,*限度降低產(chǎn)
品安全風(fēng)險(xiǎn)。
3.2 強(qiáng)化對(duì)企業(yè)生產(chǎn)過(guò)程中嚴(yán)格衛(wèi)生控制和管理
強(qiáng)化對(duì)生產(chǎn)企業(yè)的良好操作規(guī)范(good manufacturing
processing,GMP)的引導(dǎo)和落實(shí):加工過(guò)程中蠟樣芽胞桿
菌和其他微生物污染實(shí)際上很多屬于發(fā)酵環(huán)境和生產(chǎn)過(guò)
程中衛(wèi)生條件不達(dá)標(biāo)造成的,工廠廠房設(shè)計(jì)、工藝流程設(shè)
計(jì)、發(fā)酵設(shè)備的質(zhì)量控制、工器具的衛(wèi)生狀況等有密切關(guān)
系,如用木框或竹筐作為發(fā)酵容器,很容易感染青霉菌。
加工過(guò)程中沒(méi)有對(duì)生產(chǎn)環(huán)境進(jìn)行消毒和殺菌,蠟樣芽孢
桿菌容易污染,將企業(yè)管理和安全控制有效結(jié)合,建立以
HACCP體系為基礎(chǔ)的ISO22000質(zhì)量管理體系,建立現(xiàn)代
的企業(yè)管理模式,加大企業(yè)技術(shù)創(chuàng)新和技術(shù)改造投入,
提高產(chǎn)品科技內(nèi)涵,推動(dòng)傳統(tǒng)大豆制品產(chǎn)業(yè)的工業(yè)化和
現(xiàn)代化。
獨(dú)特的風(fēng)味和產(chǎn)品特色是發(fā)酵大豆制品深受消費(fèi)者
喜愛(ài)的重要原因,促進(jìn)傳統(tǒng)發(fā)酵豆制品工藝的合理化、數(shù)
字化、安全化,提升傳統(tǒng)產(chǎn)品的安全性能和工業(yè)化水平是
一項(xiàng)艱巨的任務(wù)。日本、韓國(guó)等國(guó)也對(duì)本國(guó)的發(fā)酵大豆食
品進(jìn)行系統(tǒng)研究 [45-48] ,形成獨(dú)特的消費(fèi)文化。在弘揚(yáng)傳統(tǒng)文
化同時(shí),強(qiáng)化發(fā)酵大豆食品的基礎(chǔ)研究和系統(tǒng)研究,促進(jìn)傳
統(tǒng)發(fā)酵大豆制品的新產(chǎn)品開(kāi)發(fā),加入現(xiàn)代元素,傳統(tǒng)發(fā)酵
豆制品市場(chǎng)前景會(huì)更加廣闊。
生產(chǎn)中問(wèn)題注意:
1、白點(diǎn)的控制措施
1.1 控制制曲條件
影響發(fā)酵豆制品白點(diǎn)的重要因素是發(fā)酵菌株所分
泌的蛋白酶活性,制曲時(shí)間越長(zhǎng),發(fā)酵劑分泌的蛋白
酶積集越多,成品的白點(diǎn)率也就越高。因此,控制好
制曲的溫度、濕度和時(shí)間等因素,對(duì)于控制白點(diǎn)具有
重要作用。
有生產(chǎn)商在腐乳的生產(chǎn)試驗(yàn)中,控制毛霉的生長(zhǎng)
條件,而后將毛霉接種在原料上,按照正常工藝進(jìn)行
發(fā)酵,發(fā)現(xiàn)成品腐乳的白點(diǎn)率降低了 94% [9] 。然而,
此種方法有一定的局限性,盡管減少了蛋白水解酶的
分泌,但發(fā)酵豆制品中酪氨酸及其他氨基酸的含量也
有所下降,導(dǎo)致風(fēng)味不足,外觀質(zhì)量降低。
1.2 馴化菌種
對(duì)生產(chǎn)菌株而言,若能獲得具有低活性蛋白水解
酶的發(fā)酵菌株,便能降低體系中酪氨酸的含量。根據(jù)
酶生物合成產(chǎn)物阻遏原理,可向培養(yǎng)基中添加一定量
的酪氨酸,進(jìn)行霉菌的馴化,最終獲得低酰酞酪氨酸
酶活性的菌株。將馴化后的菌株應(yīng)用到實(shí)際生產(chǎn)中,
就能達(dá)到控制白點(diǎn)的目的。
有研究者用 0.03% 的酪氨酸將腐乳生產(chǎn)所用的五
通橋毛霉和雅致放射狀毛霉,分別馴化至 15 代和 13
代,發(fā)現(xiàn)它們對(duì)酪蛋白的水解率分別降到了 74.91% 和
72.23%,后將馴化菌株應(yīng)用到實(shí)際發(fā)酵中,發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)
組的白點(diǎn)率遠(yuǎn)低于對(duì)照組,且對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量影響不大
[10] 。Niu 等[8]將 1 ~ 3 g·L -1 的酪氨酸添加到米曲霉擴(kuò)大
培養(yǎng)的培養(yǎng)基中馴化生產(chǎn)菌種,發(fā)現(xiàn)其對(duì)蛋白質(zhì)的降
解率下降;而后按照傳統(tǒng)發(fā)酵工藝生產(chǎn)蠶豆醬,發(fā)酵
的實(shí)驗(yàn)組中的酪氨酸含量從 6.49 mg·g -1 干物質(zhì)降低至
6.14 mg·g -1 干物質(zhì)(p<0.05),發(fā)酵成熟的蠶豆醬在
儲(chǔ)存 12 個(gè)月后沒(méi)有形成酪氨酸晶體。
1.3 優(yōu)化生產(chǎn)工藝
霉菌產(chǎn)生的蛋白水解酶受周圍環(huán)境的影響,溫度、
鹽度、乙醇和發(fā)酵時(shí)間等都對(duì)白點(diǎn)的形成產(chǎn)生作用,
所以工藝優(yōu)化是降低酪氨酸含量的有效方法。閔世豪
等[11]為找到能控制豆醬中酪氨酸含量的合適發(fā)酵條
件,設(shè)計(jì)了模擬培養(yǎng)基,并接種發(fā)酵菌種米曲霉進(jìn)行
發(fā)酵,在模擬發(fā)酵 70 h、30 ℃和 100 g·L -1 (鹽的質(zhì)量
濃度)下,對(duì)酪氨酸含量及蛋白分解程度進(jìn)行監(jiān)測(cè)。
結(jié)果顯示,在此條件下,發(fā)酵液中酪氨酸含量較少而
蛋白分解程度較大,降低游離酪氨酸含量的同時(shí)也不
影響其他風(fēng)味物質(zhì)的產(chǎn)生。有學(xué)者通過(guò)改變蠶豆醬中
的物料 / 液體比,優(yōu)化蠶豆醬的發(fā)酵條件,在*生
產(chǎn)工藝下,蠶豆醬樣品中酪氨酸和苯丙氨酸的含量分
別降低到 5.87 mg·g -1 和 4.81 mg·g -1[8] 。有研究者使用
不同酒精含量(12%、13%、18% 和 20%)的湯料生
產(chǎn)白腐乳,后期發(fā)酵 6 個(gè)月后觀察樣品的白點(diǎn)情況,
發(fā)現(xiàn)酒精含量為 18% 和 12% 的腐乳*出現(xiàn)白點(diǎn),
酒精含量為 13% 的腐乳出現(xiàn)白點(diǎn)的時(shí)間晚,氨基酸各
組分含量也*;此外,他還對(duì)抗氧化劑的抑制作用
進(jìn)行了實(shí)驗(yàn),用大豆異黃酮和茶多酚分別處理樣品,
結(jié)果發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組樣品的氨基酸總量和各組分含量均降
低,且白點(diǎn)率均為 0,因此可以表明在腐乳配料中加
入抗氧化劑能有效控制白點(diǎn)[12] 。
此外,表面活性劑可降低醬料的表面張力并增強(qiáng)
其界面的增溶作用,使酪氨酸不易集結(jié),也能減少醬料
的產(chǎn)生。研究人員將吐溫-80添加到成熟腐乳的湯汁中,
改善了腐乳湯汁的性質(zhì),結(jié)果發(fā)現(xiàn)白點(diǎn)的生成率比對(duì)照
組降低了 50%。這是因?yàn)槠湓黾恿死野彼岬娜芙舛龋?/p>
阻止了酪氨酸的結(jié)晶析出,減少了白點(diǎn)的產(chǎn)生
[13] 。
1.4 對(duì)成熟腐乳進(jìn)行處理
腐乳發(fā)酵成熟進(jìn)入貨架期后,微生物及其酶系仍
會(huì)繼續(xù)分解大豆蛋白質(zhì),導(dǎo)致蛋白質(zhì)過(guò)度降解產(chǎn)生大
量酪氨酸,最終形成白點(diǎn)。因此,在貨架期對(duì)發(fā)酵豆
制品進(jìn)行處理,對(duì)控制白點(diǎn)有一定作用。江景泉
[10]將成熟腐乳于 400 W 功率下微波處理后儲(chǔ)藏 2 個(gè)月,經(jīng)
滅酶處理后的樣品中蛋白酶的活力受到抑制,從而使
蛋白質(zhì)及其他多肽物質(zhì)無(wú)法被降解,對(duì)應(yīng)的游離酪氨
酸含量也減少,*的結(jié)果是沒(méi)有發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生白點(diǎn)的樣
品。朱洪康[13]對(duì)成熟腐乳進(jìn)行加熱處理,結(jié)果發(fā)現(xiàn)熱
處理后的腐乳白點(diǎn)生成率比對(duì)照組低 8.3%,同時(shí)仍具
有腐乳的基本特征,在風(fēng)味上幾乎沒(méi)有任何改變。這
是因?yàn)闊崽幚砀?,使腐乳中的蛋白酶鈍化,從而抑
制了蛋白質(zhì)的過(guò)度水解,使游離酪氨酸含量降低。
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